肠道免疫功能状态评估-肠道灌洗液抗体检测试剂盒

小鼠肠道灌洗液抗体检测试剂盒

背景简介：

肠道屏障通过防止细菌过度吸收，在维持肠道稳态中起着重要作用。分泌型IgA、IgG和IgM等免疫球蛋白参与这种保护机制。Chondrex公司推出了小鼠肠道灌洗液制备的标准方案，以及可同时检测总免疫球蛋白水平和抗原特异性抗体水平的ELISA试剂盒。由于抗抗原抗体水平可反映肠道免疫功能状态，例如：通过口服卵清蛋白（OVA）联合霍乱毒素佐剂免疫，能增强肠道内抗OVA的IgA抗体。这种免疫反应可通过检测抗OVA IgA抗体水平并与总IgA水平进行比较来评估。

产品应用：

1）  肠道免疫功能状态评估

2）  过敏原特异性抗体检测

3）  肠道相关特异性抗体检测

小鼠肠道灌洗液制备流程（抗体分析用）

基于Lycke等发表的文献方法改进的小鼠肠道灌洗制备流程如下（抗体分析用）：

1. 取出小鼠小肠组织，用剪刀夹钳夹住肠道一端。

2. 使用聚四氟乙烯（PTFE）导管注射器（避免刺穿肠道），向肠腔缓慢注入3 ml蛋白酶抑制剂溶液（含0.1 mg/ml胰蛋白酶抑制剂、50 mM EDTA、1 mM PMSF的PBS缓冲液）

3. 夹闭肠道另一端，室温孵育10分钟

4. 收集肠道内容物至试管，依次进行剧烈涡旋震荡和超声破碎处理

5. 4℃条件下1800 rpm离心10分钟

6. 取上清液转移至新管，按1 ml灌洗液添加10 μl 5%nana3的比例混合。

7. 室温孵育15分钟

8. 按1 ml灌洗液添加50 μl正常山羊血清的比例混合。该混合液可按照1:1比例

   用ELISA试剂盒配套样品稀释缓冲液稀释后进行ELISA检测

产品订购：

参考文献：

1. Tana, S. Watarai, E. Isogai, and K. Oguma. Induction of intestinal IgA and IgG antibodies preventing adhesion of verotoxin producing Escherichia coli to Caco-2 cells by oral immunization with liposomes. Lett Appl Microbiol 36, 135-139 (2003).

2. M. C. Thurnheer, A. Zuercher, J. Cebra, and N. Bos. B1 cells contribute to serum IgM, but not to intestinal IgA, production in gnotobiotic Ig allotype chimeric mice. J Immunol 170, 4564-4571 (2003).

3. S. Senda, E. Cheng, and H Kawanishi. IgG in murine intestinal secretions. Aging effect and possible physiological role. Scand J Immunol 29, 41-47 (1989).

4. N. Lycke, L. Erlandsson, L. Ekman, K. Schon, and T. Leanderson. Lack of J chain inhibits the transport of gut IgA and abrogates the development of intestinal antitoxic protection. J Immunol 163, 913-919 (1999).

如需针对特定抗原、细菌或毒素的抗体评估方案，请垂询Chondrex 中国区总代理北京博蕾德生物科技有限公司。